細(xì)胞的生長參數(shù)
1 ．翻倍時間（ Doubling Time ）
細(xì)胞的翻倍時間在評價昆蟲細(xì)胞健康程度的參數(shù)中是最容易測量的。翻倍時間應(yīng)該在細(xì)胞處于對數(shù)期復(fù)制時測量，對于 Sf9 和 Sf21 細(xì)胞來說通常是介于 16-24 小時之間，不過大多數(shù)在 20-22 小時。
dt=t × ln2/ln(Ct/Co) ，其中 dt 為翻倍時間， Co 為起始細(xì)胞數(shù)目， Ct 為經(jīng)過時間 t 后的細(xì)胞數(shù)目， t 為 Co 和 Ct 兩次計(jì)數(shù)之間的間隔時間，所有的時間都以小時為單位。
2 ．細(xì)胞大小（ Cell Size ）
細(xì)胞的大小是監(jiān)測細(xì)胞健康程度的一個非常有用的參數(shù)。如果細(xì)胞是健康的，細(xì)胞的大小均一，都處于該細(xì)胞株體積正常變化范圍的下限。細(xì)胞的大小在不同的細(xì)胞株變化是很大的。對于我用過的 Sf9 和 Sf21 ，典型的直徑是 16-18 m m ，不過我知道有些細(xì)胞株小至 14 m m 或者大至 19 m m 仍然很健康。
3 ．滯后期（ Duration of Lag ）
當(dāng)細(xì)胞的密度較低時，會有一個滯后期，其長短取決于分裝或者傳代后細(xì)胞的密度。一般說來，該密度越低，滯后期越長。對于一個特定的細(xì)胞株來說，當(dāng)這個密度高出一個閾值時，滯后期的長短與密度無關(guān)；而低于一個閾值時，滯后期無限長，細(xì)胞不再增殖。
4 ．低密度分裝極限（ Low Density Split Tolerance ）
能夠在一個較短的滯后期（小于 12 小時）復(fù)蘇的細(xì)胞形狀較好。不過這是細(xì)胞株的特性，需要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)來確定你的細(xì)胞株的密度極限。我的細(xì)胞株有些在分裝成密度為 5 × 104 細(xì)胞 /ml 時仍然可以很好復(fù)蘇，有些細(xì)胞株分裝成 5 × 105 細(xì)胞 /ml 就不能復(fù)蘇了。
5 ．高密度極限（ High Density Maximum ）
這是你的細(xì)胞能生長的最大密度，高于這個密度你的細(xì)胞將進(jìn)入平臺期。這個指標(biāo)既和細(xì)胞株有關(guān)，又和使用的培養(yǎng)液有關(guān)。我建議先把你的細(xì)胞株培養(yǎng)至平臺期，然后把一些分裝到新鮮的培養(yǎng)液中以后，使剩下的繼續(xù)生長至平臺期，同時密切監(jiān)測細(xì)胞狀況。一般來說，細(xì)胞的培養(yǎng)要避免密度超過高密度極限的 80% 。對于我培養(yǎng)的細(xì)胞，這個極限值從 2 × 106 至 12 × 106 細(xì)胞 /ml 不等。
