分光光度計測定溶液的吸光值

材料與儀器

【材料】p-Nitrophenol10×GUS assay buffer （0.5 M Na phosphate, pH 7.0; 1% Triton X-100; 0.1 Mβ-mercaptoethanol）GUS 終止液 （2.5 M 2-amino 2-methyl propanediol, 溶于水中， pH 11）

步驟

1） 配制5 mM p-nitrophenol stock solution: 秤取 _____ mg p-nitrophenol,置于400 mL 燒杯中，加入25 mL 10×GUS assay buffer,加水至約200 mL,攪拌溶解后，加水至250 mL 并混合均勻。請配制三份。

 2） 配制50 μM p-nitrophenol 溶液：分別由三份stock solution 取適量以1×GUSassay buffer 稀釋之。

 3） 取1 mL 50 μM p-nitrophenol溶液于試管中，加入0.4 mL 2.5 M 2-amino2-methyl propanediol溶液，混合均勻后測定A415. 另取1 mL 1×GUS assaybuffer,加入0.4 mL 2.5 M 2-amino 2-methyl propanediol溶液，混合均勻，亦測定A415,以作為blank. 

 4） 由Beer's Law 求出p-nitrophenol 在此測定條件下之消光系數(shù)。