α 突觸核蛋白操作指南

材料與儀器

蛋白類型：

(Alpha, Beta, Gamma)

單體, 寡聚體, 纖絲, 和原纖維

步驟

儲存條件：

單體, 寡聚體, 和未經超聲處理的原纖維和纖絲: -80oC; 保質期一年以上

超聲處理過的原纖維: -80oC; 8 周

凍融循環：

最多 2 次凍融循環

解凍條件：

原纖維, 寡聚體, 和纖絲: 37oC

單體: 置于冰上或 4oC

儲存條件 (解凍的蛋白)：

原纖維, 寡聚體, 和纖絲: 室溫. 不要將原纖維保存在冰上或者 4oC; 原纖維和纖絲在 4oC 下不穩定并會很快降解. 原纖維, 寡聚體, 和纖絲在室溫下穩定，在準備實驗時可以放在試驗臺上。

單體: 置于冰上或 4oC. 如果將單體置于室溫或者 37oC 下時間過長可能會開始聚集。

混合/移液：

原纖維處于懸浮狀態，應在使用前短暫渦旋并上下移液以確保均勻性。

單體和寡聚體在溶液中，解凍后應上下移液以確保均勻性。

纖絲是可溶性和不溶性物質的混合體，應在使用前短暫渦旋并上下移液以確保均勻性。

超聲處理：

為達到最好效果, 原纖維和纖絲應在使用前立即進行超聲處理。超聲前后也需要混合/移液以確保均勻性。單體和寡聚體不需要超聲處理。

操作安全：

適當的實驗室服裝：手套、面罩和護目鏡，需要用于所有涉及原纖維的工作，尤其是在可能產生氣溶膠的地方（例如在探頭超聲處理過程中）。用以下溶液清潔任何溢出物 10% 漂白劑或 10% SDS 水溶液。