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過氧化物酶的測定實驗-愈創(chuàng)木酚
發(fā)布日期:2024-10-25 08:36:01


過氧化物酶的測定實驗-愈創(chuàng)木酚


材料與儀器

酶樣品
磷酸鉀 鄰甲氧基苯酚 H2O2 溶液
分光光度計

步驟

實驗所需「試劑」具體見「其他」


0.97 ml 實驗混合物


0.02 ml 酶樣品(用 0.1 mol/L 磷酸鉀溶液 pH 7.0,稀釋濃縮的原料溶液大約 2000 倍)


開始加入 0.01 ml 0.1 mmol/L H2O2 溶液


隨后,25 ℃、436nm 處吸收值發(fā)生變化,ε436=25.5×103 l/(mol·cm)。(Makinen 和 Tenovon,1982)。


常見問題

試劑:

0.1 mol/L 磷酸鉀,pH 7.0


0.02 mol/L 鄰甲氧基苯酚(2-甲基苯酚,兒茶酚,氫醌單甲基醚,Mr=124.1;24.8 mg 溶于 10 ml 水中)


H2O2 溶液(約 10 mmol/L):0.06 ml 30% H2O2 稀釋于 50 ml 0.1 mol/L 磷酸鉀溶液 pH 7.0,在 240 nm 處以緩沖液為對照的吸收值約為 0.50。

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