熒光光度計(jì)法測(cè)定還原反應(yīng)

材料與儀器

LDH 稀釋溶液
磷酸鉀 NADH 丙酮酸
熒光光度計(jì)

步驟

實(shí)驗(yàn)所需「試劑」具體見(jiàn)「其他」

1.98 ml 實(shí)驗(yàn)混合物

0.02 ml LDH 稀釋溶液

25℃ 時(shí)，在 260 nm 激發(fā)，470 nm 處測(cè)定每分鐘熒光差異。用適當(dāng)濃度范圍的 NADH 濃度對(duì)熒光強(qiáng)度的標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)確定比例因子。

常見(jiàn)問(wèn)題

試劑：

0.1 mol/l 磷酸鉀 pH 7.0

0.01 mol/l NADH（71 mg 溶于10 ml H2O 中）

0.1mol/l 丙酮酸（丙酮酸鈉，Mr＝110；110 mg溶于10 ml H2O 中）。

LDH 原料溶液（從豬心臟提取，例如 10 mg/ml，用 0.1 mol/l 磷酸鉀 pH 7.0 稀釋至 1 IU/ml）