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測定肝臟或肌肉中愛普菌素、阿維菌素、多拉菌素和伊維菌素殘留量實驗
發布日期:2024-10-25 09:28:27


測定肝臟或肌肉中愛普菌素、阿維菌素、多拉菌素和伊維菌素殘留量實驗


材料與儀器

牛肝臟 牛肌肉
乙腈 正己烷 氮氣 三乙胺
離心 C8SPE柱 針筒濾膜 色譜柱

步驟

1.  提取與凈化
 
稱取勻漿的牛肝臟或肌肉2.5 g,置于50 mL離心管中,加入8 mL乙腈,潤動0.5 min, 2500 r/min離心5 min,取上清液。殘留組織用8 mL乙腈重復提取一次,合并兩次的上清液于500 mL的離心管中,加30 mL純水-三乙 胺(30 + 0.045),過C8SPE柱(500 mg,3 mL),用 20 mL乙腈-水-三乙胺(40 + 60 + 0.1)淋洗,吹干;再用3 mL正己烷淋洗,吹干;用2 mL乙腈洗脫,收集。取4 mL純水和6uL三乙胺加至乙腈洗脫液中。過C8SPE柱(500 mg,10 mL),用10 mL乙腈-水-三乙胺(30 + 70 + 0.1)淋洗,吹干,再用8 mL正己烷淋洗,吹干; 最后用2 mL乙腈洗脫,吹干,收集洗脫液于5 mL刻度試管內,50 ℃氮氣吹干,用0.5 mL乙腈定容,過0.45 um針筒濾膜,進HPLC-MS/MS分析。
 
2.  液譜-質譜串聯條件
 
色譜儀:Waters 2690;
 
流動相:乙腈-水-甲酸(95 + 5 + 0.1);
 
流速:0.2 mL/min;
 
色譜柱:C18 柱,150 mm,2.1 mm,3 um;柱溫:(20 ± 2)℃;
 
進樣量:1O0L;
 
質譜儀:電噴霧源(ESI);
 
毛細管電壓:3.2 kV;
 
錐孔電壓:70 V;
 
源溫:120 ℃ ;
 
霧化氣:300 ℃ ;
 
倍增電壓:650 V;
 
碰撞氣:氬氣。 

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