pH調整液的配制實驗
材料與儀器
NaHCO3 HEPES
步驟
一、NaHCO3液
1. 常用的濃度有7.4%、5.6%、3.7%三種，配制時，用三蒸餾水溶解后，過濾除菌，分裝小瓶，蓋緊瓶塞，4 ℃冰箱或室溫下保存。
2. 或用10 磅10 分鐘高壓蒸氣滅菌亦可；可能有部分NaHCO3被破壞，但操作簡單方便。
3. 消毒后要迅速封上瓶口，以免CO2逸出。
4. 調節溶液pH時，NaHCO3液要逐滴加入，并不時攪動培養液，以防加入過量，使pH值過度增高；如溶液內含有酚紅指示劑，可按顏色變化判定。當pH值超過后，可用高壓滅菌的10%醋酸溶液或通入CO2氣體方法調節。
二、HEPES液
HEPES可按照所需的濃度，直接加入到配制的培養液內，再過濾除菌，通常配制成500 mM的濃度
1. 用200 ml雙蒸水溶解47.6 克HEPES，用1 N NaOH調節pH 至7.5—8.0；
2. 過濾除菌后，分裝小瓶，室溫或4℃保存。
HEPES的使用，由于細胞的代謝作用，培養液很快變酸成黃色，pH 值下降。另一方面，在細胞接種量少，生長緩慢時，pH值要上升。這些對細胞的生長都不利，可以及時更換培養液，但培養基中營養并未耗盡，因此只調pH即可。調pH除用NaHCO3外亦可用氫離子緩沖劑，它們具有能較長時間控制恒定的pH值的作用，HEPES就是其中的一種。HEPES具有較強的緩沖能力；使用最終濃度一般為10—50 mM，可以根據緩沖能力的要求而定。
