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兼并引物(Degenerate Primer)PCR
發(fā)布日期:2022-11-14 08:38:31


兼并引物(Degenerate Primer)PCR


 密碼子具有兼并性,單以氨基酸順序推測(cè)編碼的DNA序列是不精確的,但可以設(shè)計(jì)成對(duì)兼并引物,擴(kuò)增所有編碼已知順序的核酸序列。用兼并引物時(shí)寡核苷酸中核苷酸序列可以改變,但核苷酸的數(shù)量應(yīng)相同。兼并度越低,產(chǎn)物特異性越強(qiáng),設(shè)計(jì)引物時(shí)應(yīng)盡量選擇兼并性小的氨基酸,并避免引物3’末端兼并,針對(duì)兼并的混合引物已成功地用于未知靶DNA的擴(kuò)增、克隆和序列分析。現(xiàn)已成功地克隆了豬尿酸氧化酶基因糖尿病相關(guān)肽基因和哺乳動(dòng)物與禽類的嗜肝病毒基因。用脫氧肌苷(deoxyinosine;DI)引物進(jìn)行PCR可以代替編碼蛋白的多種兼并密碼子中的兼并堿基,DI的特異性主要受cDNA濃度影響。


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