地高辛配基隨機標記DNA探針
1．標記DNA探針 每次標準的反應可標記10ng至3?線性的DNA，也可標記更大量的DNA，但所有的成分和體積要相應增加。
（1）DNA探針熱變性，煮沸10min，迅速冷卻于冰/乙醇中5min以上，待用。
（2）取Eppendorf管（1.5ml）置于冰上，加下列及試劑：
新鮮變性的DNA 1-3?
六聚核苷酸混合物 2?（管5）
dNTP標記用混合底物 2?（管6）
加無菌重蒸水至 19?
DNA聚合酶Ⅰ大片段（Klenow） 1?（管7）
（3）在37℃保溫至少60min，可到20h。
（4）煮沸5min，終止反應。
（5）15000rpm離心30s，置于冰上待用。
2．預雜交 按100cm2膜用20～40ml預雜交溶液，預雜交時使溶液處于流動狀態。
預雜交液組成：5?SC
0.5%（W/V）封阻試劑（管11）
0.1%（W/V）N-十二烷酰肌氨酸鈉
0.02%（W/V）SDS
膜放入塑料袋，灌入預雜交液，排除氣體后密封，在65℃預雜交過夜。
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