免疫PCR

免疫-PCR(immuno-PCR)是新近建立的一種靈敏、特異的抗原檢測(cè)系統(tǒng).它利用抗原-抗體反應(yīng)的特異性和PCR擴(kuò)增反應(yīng)的極高靈敏性來檢測(cè)抗原，尤其適用于極微量抗原的檢測(cè).

免疫-PCR試驗(yàn)的主要步驟有三個(gè):

①抗原-抗體反應(yīng)

②與嵌合連接分子結(jié)合

③PCR擴(kuò)增嵌合連接分子中的DNA(一般為質(zhì)粒DNA).

該技術(shù)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是嵌合連接分子的制備.在免疫-PCR中，嵌合連接分子起著橋梁作用，它有兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，一個(gè)與抗原抗體復(fù)合物中的抗體結(jié)合，一個(gè)與質(zhì)粒DNA結(jié)合，其基本原理與ELISA和免疫酶染色相似，不同之處在于其中的標(biāo)記物不是酶而是質(zhì)粒DNA，在操作反應(yīng)中形成抗原抗體-連接分子-DNA復(fù)合物，通過PCR擴(kuò)增DNA來判斷是否存在特異性抗原.

免疫PCR優(yōu)點(diǎn)為:

①特異性較強(qiáng)，因?yàn)樗⒃诳乖贵w特異性反應(yīng)的基礎(chǔ)上.

②敏感度高，PCR具有驚人的擴(kuò)增能力，免疫PCR比ELISA敏感度高105倍以上，可用于單個(gè)抗原的檢測(cè).

③操作簡(jiǎn)便，PCR擴(kuò)增質(zhì)粒DNA比擴(kuò)增靶基因容易得多，一般實(shí)驗(yàn)室均能進(jìn)行.

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