DNS法及聚酰胺薄膜層析技術測定蛋白質N—末端和蛋白質的氨基酸
一、目的:
學習DNS法及聚酰胺薄膜層析法測定蛋白質N—末端和蛋白質的氨基酸組成的原理及技術。
二、原理:
DNS—Cl在堿性環境里蛋白質和肽的α-氨基酸的氨基起反應,生成帶有熒光的、穩定的DNS-氨基酸
蛋白質在水解前與DNS—Cl反應,產生DNS-蛋白質,它標記在N-末端氨基酸殘基上,經水解和薄層層析 而測知是何種氨基酸。蛋白質水解后與DNS—Cl反應,標記的是蛋白質的氨基酸組成成分,如圖19-1和圖19-2所示。這是一種較為簡便的、適用的蛋白質的氨基酸組成成分分析的方法。