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SCGE中的試劑配制問題
發布日期:2023-03-02 08:10:52


SCGE中的試劑配制問題


 (1)xinglinzi 提到PBS的配制是用:

NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4?H2O 1.56g,KH2PO4 0.2g,pH7.4 滅菌。

我查到其他文獻用的是:

NaCl 160g,KCl 4g, Na2HPO4?12H2O 58g,KH2PO4 48g, pH7.4 滅菌。

對比起來,就是終液量不同,差20倍而已,

但兩組中的不同處是一個用的Na2HPO4?H2O,另一個是Na2HPO4?12H2O,請教各位這是文獻上的筆誤還是都有用的?

(2)還有Triton X-100( 1%)和DMSO 100ml (10%)的稀釋劑問題,也用上述PBS嗎?

(3)也有用的濃度是Triton X-100( 5%)和DMSO 100ml (10%),我想知道的是(2)和(3)那種是常用的呢?

注:我做的是肝臟的單細胞凝膠電泳。

1、關于PBS

我們用的PBS應該是對的。

你提供的配方是10乘的PBS配 2 升的量。而且有些試劑的量肯定不合適。比如鉀離子濃度有點大。

2、關于Triton X-100( 1%)和DMSO 100ml (10%)的稀釋劑問題。

我們是配置890mL的裂解液體,臨用前補加Triton X-100,10毫升( 1%)和DMSO 100毫升。

3、Triton X-100( 5%)應該也可以的。但這個試劑不便宜,所以,1%可以的時候,就沒有必要5%了。

關于KH2PO4的量是我往上敲錯了,應該是4.8g(而不是48g),但和你的濃度(0.2g)仍然不成比例啊?我的疑惑就在于用的是1個還是12個結晶水的Na2HPO4?對于Triton X-100和DMSO,你的意思不稀釋直接添加就是,所注的1%和10%不是濃度而是添加量對吧?


Na2HPO4幾個結晶水無所謂,我用的是 1個的。如果你用n個水的,只要進行換算就可以了。



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