大蒜細胞SOD的提取與沉淀分離

一、超氧化物歧化酶(SOD)是一種具有抗氧化、抗衰老、抗輻射和消炎作用的藥用酶。它可催化超氧負離子進行歧化反應，生成氧和過氧化氫。大蒜蒜瓣和懸浮培養的大蒜細胞中含有較豐富的SOD，通過組織或細胞破碎后，可用PH7.8的磷酸緩沖液 提取。由于SOD不溶于丙酮，可用丙酮將其沉淀析出。

二、材料與試劑：大蒜、磷酸緩沖液(0.05M，PH7.8的磷酸緩沖液)、氯仿-乙醇混合溶劑(氯仿：無水乙醇=3：5V/V)、丙酮(用前冷卻4-10℃)、磷酸鹽緩沖液(0.05M，PH10.2)

三、操作方法

1、組織或細胞破碎：稱取5g左右大蒜，置于研磨器中研磨，使組織或細胞破碎。

2、SOD的提取：將上述破碎的組織，加入2-3(10-20ml)倍體積的0.05M，PH7.8的磷酸緩沖液，繼續研磨攪拌20min，使SOD充分溶解到緩沖液中，然后用離心機 在5000r/min下，離心15min，棄沉淀，得提取液。

3、除雜蛋白：提取液加入0.25倍體積得氯仿-乙醇混合溶劑攪拌15min，5000r/min離心10min得SOD沉淀。