細胞計數
實驗目的
學習、掌握細胞培養 中最基本的細胞計數方法。
實驗原理
應用顯微鏡的成像原理,并借助血細胞計數板,計算單位體積的細胞或微小生物的數量。
材料用品
***材料:雞血紅細胞懸液
***藥品:0.17mol/L氯化鈉溶液
***儀器(請參看儀器圖庫):吸管及膠頭、細胞計數板及計數器、顯微鏡
常用細胞計數板細胞計數板之計數小格一次性細胞計數板細胞計數器
實驗步驟
1.制備雞血紅細胞懸液(1份雞血+10份0.17mol/L氯化鈉溶液)
2.用乙醇清潔計數板及專用蓋玻片,然后用綢布輕輕拭干。
3.用吸管輕吸細胞懸液,取少許細胞懸液,在計數板上蓋玻片的一側加微量細胞懸液。
4.用10×物鏡觀察計數板四角大方格中的細胞數。
5.細胞數/mL原液=(4大方格細胞數之和/4)×104×稀釋倍數
用表格表示測定的細胞密度與數目。
實驗結果
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注意事項
1、 務必使細胞分散成單個細胞,取樣計數前,應充分混勻細胞懸液。
2、 充液后靜止1-2分鐘,待紅細胞下沉后,方可進行計數。
3、 對于分布在刻線上的紅細胞,依照“數上不數下,數左不數右“的原則進行計數。計數時,如發現各中方格的紅細胞數目相差20個以上,表示血細胞分布不均勻,必須重新計數。