流式檢測細胞周期
線粒體 膜電位(MMP):使用幾種染料中的其中一種就可以檢測到細胞在凋亡過程中MMP的降低,如雙氰基-雙己氧基羰基靛藍,它能夠隱藏在活細胞的線粒體內。當MMP體系崩潰時,細胞的熒光就會減少。 磷脂酰絲氨酸(PS)在細胞表面的分布情況: PS一般分布在質膜的內側上。在細胞凋亡過程中,PS殘余物會曝露在細胞表面。這種變化可以通過復合蛋白鈣依賴的磷脂結合蛋白V與PS結合來進行檢測。所使用的細胞必須是未經修復的,因為鈣低速的磷脂結合蛋白V不能到達完整細胞的內部。PI常被用來加到二次壞死細胞中來進行鑒別。 DNA消化:在最新的細胞凋亡的一系列反應過程中,一種特異的內切核酸酶能夠將染色體這間的連接點打斷,形成大量的小片段,這些小的片段是一些低聚體,其大小約為180bp。可以通過以下兩種方法對DNA鏈的斷裂進行檢測:觀察DNA柱狀圖的sub-G1頂點;用脫氧核糖核苷末端轉移酶對DNA鏈的斷口進行標記(TUNEL檢測)。 Sub-G1點:如果細胞在乙醇中固定,隨后再水合時,一部分低分子量的DNA會被濾掉,以降低DNA的含量。這些細胞會在DNA柱狀圖中作為獨立的峰被觀察到。 TUNEL檢測: DNA鏈的斷裂末端可以通過酶標記作用進行標記。在70%乙醇中固定之前,細胞在1%多聚甲醛中固定以將小的DNA片段結合到細胞中去,然后和Tdt以及一種已標記的核苷一起進行培育。所用的這些核苷包括:地高辛-dUTP,用經FITC標記的抗地高辛配基進行檢測;生物素-dUTP,用經FITC標記的抗生素蛋白進行檢測;溴-dUTP,用抗BrdUrd的FITC進行檢測。 在加入PI標記DNA后,綠(FITC)與紅(PI)相對的熒光能夠進行記錄。凋亡的細胞會發出綠色的熒光,經染色過的DNA表明從凋亡的細胞中的細胞循環間隔會被誘導產生。
細胞生長及死亡:組織的發育和腫瘤的生長在細胞分裂和死亡的平衡是同樣的。在許多細胞動力學研究中,它們具有同樣重要的地位。細胞儀和部分多功能流式細胞儀 在程序上給予新的視覺。