細胞生長檢測4：MTS檢測法

MTS 檢測法

1． 培養(yǎng) IL-2 依賴細胞株 CTLL-2 細胞或 HT-2 細胞（檢測 IL-2 ），或者 IL-3 依賴細胞株 FDC-P1 細胞或 FL5.12 細胞（檢測 IL-3 ）到對數(shù)生長期。

2． 取 96 孔細胞培養(yǎng)板，每孔加 0.1ml 含 1 × 10⁴ ～ 2 × 10⁴ 上述細胞之一的 DMEM 培養(yǎng)液（加 10 ％小牛血清）。

3． 每孔加 0.1ml 系列稀釋的待測細胞因子（ IL-2 或 IL-3 ）樣品或細胞因子標準品，在 37 ℃ 5 ％ CO₂ 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24 小時。

4． 每孔加 20 μ l MTS/PMS 混合液，繼續(xù)培養(yǎng) 3 ～ 4 小時顯色。

5． 檢測前搖晃培養(yǎng)板 10 秒鐘，混勻顏色。在酶聯(lián)檢測儀上，波長 570nm （或 490nm ，或 570nm 和 690nm ）處檢測各孔的光吸收值（ OD ）。用樣品稀釋度對 OD 值（ OD₅₇₀ 、 OD₄₉₀ 或 OD₅₇₀ /OD₆₉₀ ）繪制劑量 - 反應曲線，根據(jù)標準品曲線計算樣品中細胞因子的量。