人類巴氏小體的觀察

一、目的
1，掌握人類x小體（巴氏小體）玻片標本制作方法
2，觀察識別巴氏小體形態特征及所在部位，
鑒定個體的性別。

二、原理
巴氏小體又稱X小體：正常女性，位于間期細胞核 中，緊貼核膜內緣，大小約1～1.5 um，呈現三角或橢圓形小體，數量為x染色體數減一。巴氏小體是由于女性兩個X染色體中的一個失活形成的。
Lyon的劑量補償學說認為：女性有兩個X染色體 ，但所表達的絕大部分遺傳物質與只有1個X染色體的男性是一樣多的。
這是因為女性的X染色體中只有1個保持活性，而另一個是晚復制的，沒有活性。該失活的染色體在形態學上
呈異染色體，即DNA螺旋壓的很緊，染色深而致密，稱之為巴氏小體。

三、實驗材料
口腔粘膜細胞，毛根鞘細胞顯微鏡，載玻片，蓋玻片，牙簽，吸管固定液（甲醇:冰醋酸＝3:1），生理鹽水，
苯酚品紅染液

四、實驗步驟
1）取材
口腔粘膜細胞：受檢者清水漱口數次，用潔凈牙簽從女性口腔兩側刮取粘膜，原位刮2～3次，第一次舍去，第2，3次分別涂于干凈載玻片上。
發根細胞：拔取女性帶有毛囊的頭發（約2cm），置于載玻片上。
2）固定
將置于離心管中的材料（口腔粘膜細胞），首先2000rpm離心20min，棄上清，加入新配置的固定液（甲醇:冰醋酸＝3:1），37℃下靜置30min，再1000rpm離心15min棄上清，加入1ml固定液（甲醇:冰醋酸＝3:1）制成細胞懸液。
置于載玻片上，待材料干后滴加固定液（95％乙醇:乙醚＝1:1）固定1h，空氣干燥。
3）染色、制片
細胞懸液一滴于載玻片上，固定20min，蒸餾水洗2～3min，1N鹽酸37℃水浴20min，晾干，滴加1～2滴染液染色20～30min（勿干），細水洗去染液，晾干。
直接涂片的：滴加染液，室溫20～30min（勿干），加蓋玻片，壓片。
發?細胞：拔掉毛干，直接滴加5N鹽酸于毛囊細胞處，處理5min，吸去鹽酸，滴加染液，染色20min，加蓋玻片，壓片。

五、鏡檢
在高倍鏡或油鏡下觀察（巴氏小體）