初代組織塊培養法
1. 剪切:把組織小塊置于小燒杯或青霉素小瓶中,用 Hanks 液漂洗二三次以去掉表面血污,吸靜 Hanks 液,用眼科剪反復剪切 1mm3 塊為止。
2. 擺布:用彎頭吸管吸取若干小塊,置于培養瓶中,用吸管彎頭把組織小塊擺布在培養瓶底部,小塊相互距離以 0.5cm 為宜,每一 25ml 培養瓶底可擺布 20~30 塊。
3. 輕輕翻轉培養瓶,另瓶底向上,注意翻瓶時勿另組織小塊流動,塞好瓶塞,置 36.5 ℃溫箱培養 2 小時左右(勿超過 4 小時),使小塊微干涸。
4. 培養:從微箱中取出培養瓶,開塞, 46 度斜持培養瓶,箱瓶底腳部輕輕注入培養液少許,然后緩緩再把培養瓶翻轉過來,讓培養液慢慢覆蓋附于瓶地上的組織小塊。置溫箱中靜止培養。待細胞從組織塊游出數量增多后。再補加培養液。