果蠅的外部形態(tài)觀察及飼養(yǎng)技術(shù)
【主要內(nèi)容】
1.果蠅的外部形態(tài)觀察及飼養(yǎng)技術(shù)
2.果蠅遺傳性狀系列雜交實(shí)驗(yàn)
3.數(shù)量性狀遺傳
4.粗糙鏈孢霉的雜交
5.人工誘發(fā)多倍體 植物
6.果蠅唾腺 染色體
7.人的外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)及染色體標(biāo)本制備
8.染色體G帶技術(shù)
9.果蠅系列雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果的觀察與統(tǒng)計(jì)
【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?span style="font-family: arial, helvetica, sans-serif; color: rgb(51, 51, 51); font-size: 14px; text-wrap: wrap; background-color: rgb(255, 255, 255);">
1、了解果蠅的生活史，識別雌雄蠅和幾種 常用的突變類型。
2、掌握果蠅的飼養(yǎng)和管理技術(shù)為下一步果蠅的系列遺傳實(shí)驗(yàn)作準(zhǔn)備
【實(shí)驗(yàn)原理】
（黑腹果蠅（Drosophila melanogaster）屬雙翅目昆蟲，具有完全變態(tài)。作為實(shí)驗(yàn)材料具有如下優(yōu)點(diǎn)：
1.生長迅速，在25℃條件下，10～12天可完成一個(gè)世代；
2.繁殖能力較強(qiáng)，1只♀果蠅可產(chǎn)卵400 ～ 500枚，因而可以在短時(shí)間內(nèi)獲得大量子代，有利于作遺傳學(xué)分析；
3.容易飼養(yǎng)，飼料易得，實(shí)驗(yàn)需用空間較小；
4.突變性狀達(dá)400以上，并且多是形態(tài)變異，便利于觀察；
5.染色體數(shù)目少(2n=8），突變基因容易在染色體上定位。
正是由于果蠅在實(shí)驗(yàn)上具有以上優(yōu)點(diǎn)，所以T．H．Morgen能夠以果蠅為實(shí)驗(yàn)材料驗(yàn)證了孟德爾的分離定律和自由組合定律，并且發(fā)現(xiàn)了連鎖遺傳定律。
【1.果蠅外部形態(tài)的觀察】
（1）果蠅生活史的觀察
卵：♀♂果蠅羽化后12小時(shí)內(nèi)不能交配，所以選處女蠅要利用這12小時(shí)。超過12小時(shí)開始交配，2天后開始產(chǎn)卵，每只雌果蠅一生中可產(chǎn)卵400—500枚，卵長0．5mm，橢圓形，端部兩側(cè)各具一纖絲。
幼蟲：受精卵經(jīng)1-2天孵化（25℃時(shí)12小時(shí)開始孵化），經(jīng)4-5天2次蛻皮，成為3齡幼蟲，體長可達(dá)4-5mm。
蛹：3齡幼蟲爬上培養(yǎng)瓶內(nèi)壁化蛹，蛹梭形、由淡黃至黃褐色。
成蟲：蛹期約4天開始羽化，一般傍晚羽化的數(shù)量比黎明的多。剛羽化的成蟲體較大。色較淡、翅還未展開、體表因未完全幾丁化（chitinous）而顯得較軟。
果蠅世代圖
（2）野生型與突變型相對形狀的觀察
1.逐一麻醉各品系果蠅（注意要適度麻醉）。
2.把麻醉的果蠅傾倒在白瓷板上，移到解剖鏡下觀察。
3.鑒別野生型與突變型的相對性狀。
果 蠅 類 型 復(fù) 眼 體 色 翅 型 剛 毛
野生型紅色灰黃長翅直突變型白色黑檀殘、短卷曲
圖片：
野生型與突變型果蠅的眼色
野生型與突變型果蠅的體色
野生型與突變型果蠅的翅形
野生型與突變型果蠅的剛毛
直剛毛
卷剛毛
（3）雌雄果蠅的觀察與鑒別
第一性征：
♂ 腹部末端無幾丁化黑點(diǎn)
♀腹部末端有幾丁化黑點(diǎn)
副性征：
A.腹部末端尖長（ ♀ ）對頓圓（♂ ）
B.腹部背面有3條黑色條紋對5條黑色條紋
C.腹部腹面有4各腹片對6個(gè)腹片
D.第一對足的跗節(jié)有性梳對無性梳
E.體型較大對較小
圖片：
雌雄蠅
雌雄果蠅形態(tài)特征比較
果蠅第一對足跗節(jié)基部的性梳
【 2.果蠅的培養(yǎng)】
（1）培養(yǎng)基的配制
培養(yǎng)基配方：
以配制1000ml為例，需要紅糖80克，瓊脂10克，麥麩80克，玉米粉20克，丙酸7ml，酵母10克。
配制方法：
1.將紅糖80克、瓊脂10克、水700ml置于鍋里共煮沸至全溶化。
2.麥麩80克，玉米粉20克，水300ml調(diào)成糊狀。
3.將2加入1中邊煮邊攪拌，連續(xù)煮沸20min，離火立即加入丙酸7ml，酵母10克，攪拌均勻，趁熱分裝到消毒過的培養(yǎng)瓶。
(2)接種蠅培養(yǎng)
待培養(yǎng)基冷卻，水蒸氣揮發(fā)后，塞好棉塞接好蠅種，放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
【 注意事項(xiàng)】
1.分裝培養(yǎng)基時(shí)注意不要沾到試管或培養(yǎng)瓶口，如果沾到，則待培養(yǎng)基凝固后，用擰干的酒精棉球把培養(yǎng)基下推，以免棉塞蘸到培養(yǎng)基，造成污染。
2.配好的培養(yǎng)基應(yīng)放到干凈的地方保存。
3.在接放果蠅時(shí)，要注意正確使用乙醚麻醉劑，用完后應(yīng)立即蓋好，同時(shí)實(shí)驗(yàn)室保持通風(fēng)。
【 作業(yè)】
1. 把觀察五個(gè)品系的相對性狀結(jié)果填入下表。
品系 復(fù)眼 體色 翅形 剛毛 2 #6 #18 #22 #e
2. 把鑒別雌雄果蠅的第一性征、副性征填入下表。雌雄外生 殖器腹部 末端腹部 背面腹部 腹面性梳體型 大小♀♂
3、問答題：
（１）在５個(gè)果蠅品系中哪一個(gè)品系是野生型？
（２）用肉眼分揀雌雄果蠅時(shí)，應(yīng)抓住哪一主要特征？如何挑處女蠅？
（ 3）要完成三個(gè)實(shí)驗(yàn)（果蠅的單因子實(shí)驗(yàn)、果蠅的伴性遺傳實(shí)驗(yàn)、果蠅兩對基因的自由組合實(shí)驗(yàn)）的正確雜交組合，要求用實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的5個(gè)品系，設(shè)計(jì)6個(gè)雜交組合（每一個(gè)實(shí)驗(yàn)有正交和反交組），如何設(shè)計(jì)？
