蛋白質沉淀反應—加熱沉淀蛋白質
實驗原理
大多數蛋白質在加熱時，由于空間結構被破壞而喪失其穩定性，因此變性凝固。
蛋白質的熱變性作用與加熱時間平行，并隨溫度的升高而加快。
短時間加熱可引起凝固。加熱時，鹽類的存在及溶液酸堿度對蛋白質的凝固有很大影響。
處于等電點狀態的蛋白質加熱時凝固最完全、最迅速。在強酸強堿溶液中，蛋白質分子帶有正電荷或負雖加熱也不凝固。
但溶液中若有中性鹽存在，則蛋白質可因加熱而凝固。
試劑
1.蛋白質溶液(與雙縮脲反應相同)
2.1％醋酸溶液
3.10％醋酸溶液
4.10％氫氧化鈉溶液
5. 飽和氯化鈉溶液
實驗操作
取試管4支依下表所示添加 試劑 。
試劑 | 管號 | |||
1 | 2 | 3 | 4 | |
蛋白質樣液(ml) | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
1% 醋酸，滴 | 1 | — | — | — |
10% 醋酸，滴 | — | 10 | — | — |
10% NaOH，滴 | — | — | 10 | — |
蒸餾水，滴 | 10 | 1 | 1 | 11 |
現象 | ||||
加畢混勻，觀察各管的情況。
然后放入沸 水浴 中加熱10分，注意觀察比較各管的沉淀情況。
其中2號管溶液接近于蛋白質等電點，最不穩定，最先沉淀；
其次是第一管；3號和4號管因在較強的酸或堿下，蛋白質帶有大量的電荷，雖然加熱也不沉淀。
向第三管中加入少許飽和氯化鈉溶液，立即出現白色沉淀。
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