核酸雜交技術(shù)(Southern Blot、Northern Blot ）

（一）Southern Blot
原理：
將待檢測的DNA分子用/不用限制性內(nèi)切酶消化后，通過瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行分離，繼而將其變性并按其在凝膠中的位置轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素薄膜或尼龍膜上，固定后再與同位素或其它標(biāo)記物標(biāo)記的DNA或RNA探針進(jìn)行反應(yīng)。如果待檢物中含有與探針互補(bǔ)的序列，則二者通過堿基互補(bǔ)的原理進(jìn)行結(jié)合，游離探針洗滌后用自顯影或其它合適的技術(shù)進(jìn)行檢測，從而顯示出待檢的片段及其相對大小。
用途：檢測樣品中的DNA及其含量，了解基因的狀態(tài), 如是否有點(diǎn)突變、擴(kuò)增重排等。
（二）Northern Blot
原理：在變性條件下將待檢的RNA樣品進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，繼而按照同Southern Blot相同的原理進(jìn)行轉(zhuǎn)膜和用探針進(jìn)行雜交檢測。
用途：檢測樣品中是否含有基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物（mRNA）及其含量。
（三）探針標(biāo)記技術(shù)
1 標(biāo)記物：放射性和非放射性兩種
放射性：
非放射性： 生物 素、地高辛素、熒光素
2、標(biāo)記方法
（1）切口平移法
（2）隨機(jī)引物法
（3）末端標(biāo)記法
（4）單鏈DNA探針標(biāo)記
（5）寡 核苷酸 探針標(biāo)記法