最新血液RNA提取
1 、血液收集:最好用肝素抗凝,因為 EDTA 可能會對后續的 pcr 有影響,因為 EDTA 會螯合 pcr 反應中的 Mg2+ ,也可以根據實驗的具體要求看選擇怎么樣的抗凝。
2 、白細胞的分離:一般選擇 1.5ML 新鮮的血液,或選取冷凍的 5ML 的血液(冷凍血液的保存:先液氮速凍,再置于 -80 °保存),或隔天的 5ML 的血液,就可以分離到比較多的白細胞了??梢赃x擇溶紅素( BD 公司的)或紅細胞裂解液按一定的比例( 1 : 3 或 1 : 5 )分離白細胞,一般在 3500 轉離心 6 分鐘即可,效果不好的話,可以重新裂解一次。分離得到的白細胞,立刻用質量好的 TRIZOL 裂解白細胞,如果不能馬上提取的話,可以置于 -20 或 -80 °保存,過后抽提。
3 、 RNA 抽提:選擇一般的組織或細胞的 RNA 抽提試劑盒即可。