質(zhì)粒轉(zhuǎn)化步驟
一、操作步驟：
1. 從-80℃冰箱中取出對(duì)應(yīng)的感受態(tài)細(xì)胞，室溫下置于冰盒上解凍，標(biāo)記;
2. 向感受態(tài)細(xì)胞中加入2μl的質(zhì)粒，置于4℃冰箱中,冰浴30min;
3. 在42℃水浴鍋中熱激1min，然后立即在冰盒上放置2min；
4. 每管加900μl LB培養(yǎng)基，37℃搖床震蕩,150rpm×45min；
5. 取100μl 轉(zhuǎn)化液加入對(duì)應(yīng)抗性的平板中，倒入適量玻璃珠，涂勻液體；
6. 將平板倒置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過(guò)夜。
二、注意事項(xiàng)：
1. 感受態(tài)可用滅菌的離心管分裝使用。
2. 根據(jù)需要在第5步驟時(shí)將轉(zhuǎn)化液6000rpm離心3min，然后只留下100μl左右的上清液，混勻沉淀，全部加入相對(duì)應(yīng)的平板中。
3. 轉(zhuǎn)化過(guò)程在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行。
4.質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)：不要長(zhǎng)太小 太密或培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，菌體大小適中 對(duì)著光看飽滿透亮，平板不要長(zhǎng)太多衛(wèi)星菌落
