準備大組織的厚切片進行β-半乳糖苷酶染色

原理

材料與儀器

小鼠或雞的整個胚胎、組織或外植體
4%（m V)瓊脂糖 氰基丙烯酸鹽黏合劑（如Superglue) l00 mmol L磷酸鈉鹽緩沖液 pH 8.0
振動切片機（如VT 1000S; Leica)

步驟

1) 固定和洗滌組織。

2) 將組織放置在100 mL燒杯中，用吸管輕柔吸取大部分的洗滌緩沖液。在37?40℃加入足夠的4%中等強度的瓊脂糖覆蓋組織（讓燒杯傾向于組織這邊）。旋動燒杯混勻并使充分覆蓋組織。

3) 室溫將燒杯放置成45°角直到瓊脂糖變硬（約10 min)。

4) 用一刀片調整瓊脂糖塊使之成方形，每邊留出2?3 mm。

5) 用氰基丙烯酸鹽粘合劑在合適的方向（如冠狀切面）粘住瓊脂糖塊，使之粘到振動切 片機的標本支持機托盤上。將該托盤放進振動切片機，給整個槽裝滿100 mmol/L的 磷酸鈉鹽緩沖液，pH 8.0。

6) 切片 (細節參考振動切片機手冊）。小心地從振動切片機槽內移走切片，放 入β-半乳糖苷酶洗滌緩沖液直到準備染色。進行組織染色。

7) 觀察和攝影染色的厚切片