Biotin-HCPT生物素化羥喜樹堿的合成以及檢測說明
【產(chǎn)品介紹】：
Biotin-HCPT生物素化羥喜樹堿的合成以及檢測說明
羥基喜樹堿(10-HCPT;10-Hydroxycamptothecin) 是一種從喜樹中分離的 DNA 拓?fù)洚悩?gòu)酶 I (DNA topoisomerase I) 抑制劑。(S)-10-Hydroxycamptothecin 可顯著誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并可用于肝癌，胃癌，結(jié)腸癌和白血病的研究。
Biotin-HCPT生物素化羥喜樹堿的合成示意圖
Biotin-HCPT生物素化羥喜樹堿的純化KTA 中低壓液相系統(tǒng)中采用 Resource15 反相柱以如下條件進(jìn)行純化分液：體積分?jǐn)?shù)為 30%的甲醇、體積分?jǐn)?shù)為 70%的乙腈。洗脫梯度：A 液洗(100%(20CV)、100%B 液(5CV)，檢測波長：358 nm。洗脫流速為 1.0 mL圖的出峰情況，相應(yīng)收集各個色譜峰，將其濃縮蒸干，冷凍干燥后用方法斷哪個產(chǎn)物是生物素化羥喜樹堿。素化羥喜樹堿的液質(zhì)聯(lián)用檢測樹堿生物素化合成反應(yīng)液純化分離產(chǎn)物用 HPLC-MS 分析儀和分析型 柱進(jìn)行對產(chǎn)物的純度、分子量和化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析鑒定。
生物素化羥喜樹堿的純化分離色譜圖
制不同加藥濃度下的細(xì)胞生長抑制曲線，計算藥物對細(xì)胞的半數(shù)抑制50%時藥物的濃度)。驗結(jié)果生物素化羥喜樹堿的制備與鑒定用酯化法合成 Biotin-HCPT，由于 HCPT 含有 2 個可參加反應(yīng)的羥基 的生物活性，加入了過量的 HCPT 以得到按 1：1 比例連接的 Biotin-H量的 HCPT 和合成的 Biotin-HCPT 得到很好的分離(如圖 2-2 所示)
