反轉錄酶
反轉錄酶(Reverse transcripatase)是以RNA為模板指導三磷酸脫氧核苷酸合成互補DNA(cDNA)的酶。哺乳類C型病毒的反轉錄酶和鼠類B型病毒的反轉錄酶都是一條多肽鏈。鳥類RNA病毒的反轉錄酶則由兩上亞基結構。真核生物中也都分離出具有不同結構的反轉錄酶。這種酶需要鎂離子或錳離子作為輔助因子,當以mRNA為模板時,先合成單鏈DNA(ssDNA),再在反轉錄酶和DNA聚合酶Ⅰ作用下,以單鏈DNA為模板合成“發夾”型的雙鏈DNA(dsDNA),再由核酸酶S1切成二條單鏈的雙鏈DNA。因此,反轉錄酶可用來把任何基因的mRNA反轉錄成cDNA拷貝,然后可大量擴增插入載體后的cDNA。也可用來標記cDNA作為放射性的分子探針。
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