虎杖金銀花聯(lián)用抗Ⅱ型皰疹病毒的藥效分析
關(guān)鍵詞： 虎杖 金銀花 抗Ⅱ型皰疹病毒 藥效
Herpes simplex virus type-2(HSV-2)是外陰皰疹及宮頸癌等多種疾病的病因之一。阿昔洛韋(acyclovir, ACV)治療HSV-2感染易產(chǎn)生耐藥毒株；cidofovir腎毒性很大；HSV疫苗效果不佳。因此，研制抗病毒新藥是相當(dāng)重要的任務(wù)。
據(jù)報(bào)道，10%虎杖水煎液對(duì)HSV-1、HSV-2、甲型流感病毒京科68-1株等多種病毒有抑制作用。金銀花能延緩呼吸道合胞病毒的CPE。為了獲得虎杖金銀花抗HSV制劑的最佳配方比，我們用空斑減數(shù)實(shí)驗(yàn)，以ACV為陽(yáng)性對(duì)照，觀察了虎杖金銀花單用及聯(lián)用抗HSV-2 333株的藥效，并且用中效作用原理，對(duì)藥效進(jìn)行了分析。
抗病毒實(shí)驗(yàn)以3種方式進(jìn)行：(1)病毒懸液與含藥培養(yǎng)液37℃孵育1小時(shí)，感染細(xì)胞，這是藥物對(duì)HSV-2的直接殺滅。(2)以含藥培養(yǎng)液預(yù)先與細(xì)胞孵育2小時(shí)，再以HSV-2感染細(xì)胞，這是藥物對(duì)HSV-2感染細(xì)胞的阻斷。(3)先接種病毒，再以含藥培養(yǎng)液孵育，這是對(duì)HSV-2增殖的抑制。實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性及陽(yáng)性對(duì)照組，所用感染復(fù)數(shù)為1Pfu/細(xì)胞。同時(shí)，以臺(tái)盼藍(lán)拒染法作細(xì)胞毒試驗(yàn)。以Chou和Talalay導(dǎo)出的中效方程式及合用指數(shù)(Combination index, CI)方法對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。CI＜1，表示協(xié)同；CI=1，表示相加；CI＞1，表示拮抗。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
1.ACV對(duì)HSV-2 333株直接殺滅、增殖抑制、感染阻斷的ED50分別為16.45 mg/L、10.85 mg/L、18.62 mg/L。虎杖與金銀花以1(ED50)虎杖/2(ED50)金銀花聯(lián)用時(shí)，相應(yīng)數(shù)值為0.25 mg/L、0.46 mg/L、3.18 mg/L，比ACV藥效強(qiáng)。2.在3種抗病毒實(shí)驗(yàn)中，空斑減數(shù)率為20%～80%時(shí)，CI均＜1，說(shuō)明兩藥聯(lián)用對(duì)抗HSV-2 333株有明顯的協(xié)同作用。3.ACV對(duì)HEP-2細(xì)胞的IC50為1 085 mg/L，金銀花IC50為46 020 mg/L，虎杖IC50為57 850 mg/L, 金銀花虎杖聯(lián)用IC50為98 240 mg/L。4.從治療指數(shù)(treatment index, TI)來(lái)考慮，TI=IC50/ED50。如果統(tǒng)一按直接殺滅、對(duì)增殖抑制、對(duì)感染阻斷的順序排列，ACV對(duì)HSV-2 333株的TI為66、100、58。虎杖/金銀花=1 (ED50)虎杖/2(ED50)金銀花時(shí)，對(duì)HSV-2 333株的TI為392 960、213 565、30 893，是ACV TI的5 954、2 135、532倍。這種聯(lián)用藥效比ACV強(qiáng)，毒性比ACV小，是最佳配方比。
中性作用原理已為國(guó)外醫(yī)學(xué)界廣泛應(yīng)用，但是對(duì)中草藥復(fù)方，其藥物間相互作用的藥效分析，尚未見(jiàn)用此原理分析的報(bào)道。本研究通過(guò)用中效作用原理對(duì)藥效的分析，為中藥組方配方提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
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