Hoechst 33258染色

1．原理

Hoechst 33258和Hoechst 33342均為非嵌人性熒光染料。它們在活細胞中 DNA聚AT序列富集區域的小溝處與DNA結合。

活細胞或固定細胞均可從低濃度溶液中 攝取該染料。從而使細胞核著色。故又把此類染料稱為DNA探針。Hoechst 33342和Hoechst 33258均可溶于水并在水溶液中保持穩定。Hoechsr-DNA的激發和發射波長分別550nm和460nm。在熒光顯微鏡紫外光激發時，Hoechst-DNA發出亮藍色熒光。

2．溶液的配制

(1)Hoechst 33258儲存液

Hoechst 33258 lmg

0．01mol／LPBS(pH 7．4) 5ml

(2)Hoechst 33258工作液(終濃度為0．5ug／ml)

Hoechst 33258濃縮液 125ul

0．01mol／LPBS(pH 7．4) 50ml

3．操作程序

(1)細胞懸液或培養單層細胞等標本，用醋酸―乙醇或Carnoy固定液固定；

(2)0．01mol／LPBS漂洗5分鐘；

(3)Hoechst 33258工作液染色，室溫15分鐘；

(4)0．01mol／LPBS漂洗3次，每次5分鐘；

(5)用甘油與PBS比例為1：9的混合液或水溶性封片劑封片，熒光顯微鏡觀察。

結果：該染料為DNA的特異性熒光探針，細胞核呈亮藍色熒光

北京天優福康生物科技有限公司

官網：http://m.jyzjsd.com/

服務熱線：400-860-6160 

聯系電話/微信：13718308763  

QQ:2136615612      3317607072

E-mail：Tianyoubzwz@163.com