實用哺乳動物細胞培養手冊
細胞培養基本概念
細胞培養是指從體內組織取出細胞在體外模擬體內環境下,使其生長繁殖,并維持其結構和功能的一種培養技術。細胞培養的培養物可以是單個細胞,也可以是細胞群。
細胞培養目的與用途
1、科學研究:藥物研究開發與基礎研究
藥物研究與開發
(1) 新藥篩選:如化學合成藥物藥效研究、中藥有效成分篩選與鑒定等。
(2) 疫苗研究與開發:如病毒性疫苗的研究與開發(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、腫瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(3) 基因工程藥物研究與開發:如干擾素研究與開發,細胞生長因子研究與開發等。
(4) 細胞工程藥物研究與開發:生物活性多肽研究與開發,人參皂甙、紫杉醇等生物活性成分研究與開發。
(5) 單克隆抗體制備:包括診斷用單克隆抗體,治療用單克隆抗體。
基礎研究
(1) 藥物作用機理
(2) 基因功能
(3) 疾病發生機理
2、 生物制藥
(1) 疫苗生產:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、腫瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(2) 基因工程藥物生產:如在臨床醫學中具有治療價值的一些細胞生長因子如干擾素、粒細胞生長因子、胸腺肽等
(3) 診斷用和藥用單克隆抗體生產
(4) 細胞工程藥物生產:生物細胞內的一些生物活性多肽,生物活性物質等
細胞培養基本條件
1、合適的細胞培養基
合適的細胞培養基是體外細胞生長增殖的最重要的條件之一,培養基不僅提供細胞營養和促使細胞生長增殖的基礎物質,而且還提供培養細胞生長和繁殖的生存環境。
2、優質血清
目前,大多數合成培養基都需要添加血清。血清是細胞培養液中最重要的成分之一,含有細胞生長所需的多種生長因子及其它營養成分。
3、無菌無毒細胞培養環境
無菌無毒的操作環境和培養環境是保證細胞在體外培養成功的首要條件。在體外培養的細胞由于缺乏對微生物和有毒物的防御能力,一旦被微生物或有毒物質污染,或者自身代謝物質積累,可導致細胞中毒死亡。因此,在體外培養細胞時,必須保持細胞生存環境無菌無毒,及時清除細胞代謝產物。
4、恒定的細胞生長溫度
維持培養細胞旺盛生長,必須有恒定適宜的溫度。
5、合適的氣體環境
氣體是哺乳動物細胞培養生存必需條件之一,所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。
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