vero（非洲綠猴腎細胞)的傳代

傳代步驟比較傳統(tǒng)：

倒掉培養(yǎng)液－>PBS洗2遍－>胰酶0.25%消化－>倒掉胰酶－>加培養(yǎng)基－>用吸管吹打均勻－>分瓶－>放置37度，5%CO2孵箱。

我的體會是：

1、消化時間和實驗環(huán)境溫度也有很大關系，我們實驗室條件比較差，不能維持恒溫（不過我想大部分實驗室目前也還是做不到的）。夏天的時候，消化特別快。但是到了冬天，就很慢，要用手捂老半天。

2、消化到什么程度可以，經(jīng)驗很重要，如果每瓶消化都要通過顯微鏡觀察來判斷，首先效率太低，而且還很容易消化過頭。對光觀察培養(yǎng)瓶，當感覺到有些泛白，瓶角有少許細胞脫離的時候就可以了，倒掉消化液，用手輕拍培養(yǎng)瓶就能脫離了。

3、一般培養(yǎng)的時候，就用5%的小牛血清，只有剛傳代的時候才用10％的。感覺這樣，細胞不會長的特別快，3-4天換一次液完全沒有問題。

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