FRTL-5細胞的傳代
在F-12培養基中加入5%小牛血清、10mU/ml TSH、10μg/ml胰島素、5μg/ml轉鐵蛋白、10ng/ml生長抑素、0.4ng/ml氫化可的松、10ng/ml甘氨酰-組胺酰-賴氨酸醋酸鹽,每100ml培養液加入1ml雙抗,用200ml培養瓶置CO2孵箱35℃培養。
每4天換液一次。待細胞有80%融合時進行傳代。大約7-10天傳一代。
將生長狀態良好、有80%融合的FRTL-5細胞棄培養液, 0.2%EDTA:0.25%胰蛋白酶1:3的消化液大約3ml加入200ml培養瓶中,待有大面積細胞脫落時,加入培養液終止消化。
用吸管輕輕吹打幾下就可以成單細胞懸液。分裝入兩個培養瓶,傳代完成,中間不需要離心。如果過早中止胰酶作用,很難吹打成單細胞懸液。
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