高效液相色譜儀常規(guī)分析操作步驟及規(guī)程
1). 嚴(yán)格過濾色譜純流動相,根據(jù)需要選擇不同的濾膜。
2). 對抽濾后的流動相進(jìn)行超聲脫氣20~30分鐘。
3). 打開色譜工作站,連接好流動相管道,連接檢測系統(tǒng)。
4). 有一段時間沒用,或者換了新的流動相,需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥,沖洗時速度不要超過10ml/min。
5). 調(diào)節(jié)流量,初次使用新的流動相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過2000psi。選用合適的流速。
6). 設(shè)定不同樣品的檢測器分析參數(shù)。
7). 等基線走穩(wěn)即可進(jìn)樣分析,分析樣品時對樣品的前處理非常重要。
8). 關(guān)機時,先關(guān)檢測器,泵不要關(guān)掉,應(yīng)改用流動相沖洗泵,不同的流動相沖洗時間不同,一般沖洗30min,若是緩沖鹽作流動相應(yīng)先用水沖洗30min,再用純甲醇沖洗。
9). 然后關(guān)液相泵。
10). 需要把進(jìn)樣閥沖洗干凈,另把注射器等工具清理整潔。
11). 填寫登記本,由負(fù)責(zé)人簽字。
注意事項:
1.首先必須是HPLC級的,這一條相信大家都做到了。
2.脫氣。由于流動相里含有微量空氣,經(jīng)泵的壓力作用,會在流通池里產(chǎn)生氣泡,這對分析產(chǎn)生一定的影響,如噪音增大,甚至于掩蓋信號峰。因此,流動相在使用前必須經(jīng)超聲脫氣20分鐘以上。
3.過濾。由于流動相里有很微小的垃圾,如不經(jīng)過過濾,偶爾會卡在單向閥門中,從而產(chǎn)生壓力波動。這一點很多用戶不太注意,等到產(chǎn)生壓力波動又不知道什么原因產(chǎn)生的。
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