血清正確的使用方法

血清必須貯存于–20～-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40～45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結凍時體積會增加約10%,必須預留此膨脹體積之空間,否則易發生污染或容器凍裂之情形。2.一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發現血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養基內一起過濾,勿直接過濾血清。3.瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40～45ml。在溶解過程中須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發生沈淀。):4.heat-inactivation是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。加熱過程中須規則搖晃均勻。此熱處理之目的是使血清中之補體成份(complement)去活化。除非必須,一般不建議作此熱處理,因為會造成沈淀物之顯著增多,且會影響血清之品質。補體參與之反應有：cytolytic activities,contraction of smooth muscle,release of hist amine from mast cell sand platelets,enhancedphagocytosis,chemotaxisand activation of lymphocytic and macrophage cell type。5.勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質。6.血清之沉淀物6.1.凝絮物：發生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein)變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin)造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。6.2.顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養此“微生物 “,但在37℃環境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物 之增殖,但以培養細菌 之培養基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質,應立即停用,更換另一批號的血清。