細胞介導細胞毒作用檢測法1：Cr釋放法
1 ）用 51 Cr 鉻酸鈉標記靶細胞
短期標記法
1． 用 RPMI-1640 培養液洗滌 107 靶細胞，去上清液。用 0.5ml 不含碳酸氫鈉的完全培養液懸浮細胞。加入 100 μ Ci （ 3.7MBq ） 51 Cr 鉻酸鈉， 37 ℃水浴中標記 1 小時，每 5 ～ 10 分鐘搖晃一次，混勻細胞。
2． 如上用 RPMI-1640 培養液洗滌細胞 3 次，每次 400 × g 10 分鐘。用 50ml RPMI-1640 培養液懸浮細胞，置 37 ℃水浴 30 分鐘，以減少非特異的自然釋放。
3． 離心 200 × g 10 分鐘，去上清液。小心用 RPMI-1640 培養液懸浮細胞，盡量減少振蕩引起的細胞損傷以降低靶細胞的自然釋放率，將細胞濃度調整為 0.5 × 105 或 1 × 105 /ml 備用。
2 ） 4 小時 51 Cr 釋放實驗
1． 在 96 孔圓底細胞培養板中加入 51 Cr 標記的靶細胞，每孔加 100 μ l 。
2． 向各孔加 100 μ l 效應細胞，效應細胞與靶細胞的比例（效靶比， E ： T ）根據要求而定，通常為 5 ： 1 ～ 20 ： 1 。陰性對照孔（自然釋放）不加效應細胞只加 100 μ l 完全培養液，陽性對照孔（最大釋放）中加 100 μ l 1 ％ NP40 （或 2 ％ SDS ， 1mol/L 鹽酸）。每個實驗置三個復孔。
3． 稍稍離心（ 100 × g 3 分鐘）后，置 37 ℃ 5 ％ CO2 的二氧化碳培養箱中培養 4 小時。
4． 離心培養板 200 × g 10 分鐘，每孔吸出 100 μ l 上清液置一次性使用的檢測管中，在γ－計數儀上（或液閃計數儀上）測定上清液中的每分鐘放射性活性（ cpm 值）。
3 ）特異性殺傷活性的計算
1． 用細胞毒性百分比表示：細胞毒性（％）＝ [ （實驗組 cpm －自然釋放組 cpm ） / （最大釋放組 cpm －自然釋放組 cpm ） ] × 100 ％
2． 用溶解單位（ lytic unit ， LU ）表示：一個 LU 是指能溶解一定數量靶細胞的效應細胞數。通常將能溶解 30 ％靶細胞的效應細胞數定位一個 LU 。結果以 106 個效應細胞所具有的 LU 數表示： LU30 /106 細胞＝ 106 /[ （ E ： T30 ）×（每孔靶細胞數） ] E ： T30 是該效靶比時效應細胞能殺傷 30 ％靶細胞
