血清使用知識點介紹

• 細胞培養基的配制

使用血清知識介紹:

1、存放血清最好的辦法?

血清應保存在-20℃以下。若存放于4℃時，請勿超過半個月。

2、如何解凍血清才不會使質量受損?

血清從冷凍箱取出后，先置于2-8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融，溶解過程中必須規則地搖晃均勻。

3、如何處理血清解凍后出現的絮狀沉淀物?

血清中沉淀物的出現有許多種原因，但主要原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成。血纖素蛋白(形成凝血的蛋白之一)也是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物并不影響血清本身的質量。若欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內，稍微離心，上清液即可接著加入培養基內一起過濾。以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物會導致過濾膜的阻塞。

4、為什么要熱滅活血清?

加熱可以滅活補體系統。激活的補體將會參與有關細胞的溶解過程，刺激平滑肌收縮、細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。建議在培養ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時，使用熱滅活血清。

5、有必要做熱滅活嗎?

大多數細胞的培養不需要經過熱滅活處理的血清。熱滅活血清對細胞的生長只有微小的促進或完全沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的活性，造成細胞生長速度的降低。同時經過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物會讓使用者誤以為是微生物 的污染。若非必須，可以不需要做熱處理這一步，不但節省時間，更確保血清的質量。

6、如何避免沉淀物的產生?

建議在使用血清的時候，注意下列的操作：

(1)解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37 ℃)，非常容易產生沉淀物。

(2) 解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。

(3)請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。

(4) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多。若非必要,可以無須進行熱滅活處理。

(5) 若必須做血清的熱滅活,應嚴格控制56℃熱處理30分鐘,并且隨時搖晃均勻。溫度過高、時間過久以及搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。