有絲分裂中期染色體觀察
一.實驗目的:
學習 染色體 壓片的方法,觀察有絲分裂各時期的細胞及中期染色體的形態結構。
二.實驗原理:
各種生長旺盛的 植物 組織,常進行著細胞分裂。經過適當的取材處理,加以固定、離析、染色、壓片方法,可以迅速地將細胞分散附著在載片和蓋片之間,進行有絲分裂和染色體動態觀察,是遺傳學研究的一種基本方法。
三.實驗材料、用具及試劑
實驗材料:洋蔥根尖
用具:顯微鏡、解剖器材、載玻片、蓋玻片、酒精燈等。
試劑:無水乙醇、70%乙醇、冰醋酸、秋水仙素、改良的苯酚品紅、解離液(濃鹽酸:95%乙醇 1:1)
四.實驗步驟:
1.預處理:將洋蔥的鱗基置于盛水的小燒杯上,放在25℃溫箱中,待根長到2cm時,在上午九時摘下根尖,放到0.02%秋水仙素溶液中,浸泡處理3-4小時。(浸泡在蒸餾水中4度 24小時)
2.固定:經過前處理的根尖,再放到卡諾固定液中,固定24小時。固定材料可轉入70%乙醇中,在4℃冰箱中保存。
3.解離:從固定液中取出根尖,用蒸餾水漂洗,再放到解離液中,室溫水解10min。
4.染色壓片:將經過解離的根尖用蒸餾水漂洗數次,放在新培養皿里。然后將根尖放到載玻片上,切取根尖分生組織,加1-2滴改良的苯酚品紅,靜置10min。蓋上蓋玻片,用吸水紙吸取多余的染料,在酒精燈上緩慢往復3-4次,注意不要沸騰。在載片與蓋片之間放一刀片,用解剖針柄輕敲蓋片的四角,再用拇指適當用力下壓,使材料分散成薄薄的一層。在顯微鏡下鏡檢。