siRNA的制備方法和RNAi用途介紹

siRNA制備方法：

一、體外制備
      1、化學合成
      2、體外轉(zhuǎn)錄
      3、用RNase III 消化長片斷雙鏈RNA制備siRNA

二、體內(nèi)表達
      1、siRNA表達載體或者病毒載體在細胞中表達siRNAs
      2、PCR制備的siRNA表達框在細胞中表達

RNAi可以直接用于疾病相關(guān)基因的抑制，從而達到疾病治療或預防的目的。例如在抗腫瘤治療中， RNAi可用于抑制癌基因的表達；或者利用RNAi的高度特異性敲除點突變激活的癌基因；也可用于抑制基因擴增或抑制融合基因表達；還可用于抑制其他與腫瘤發(fā)生發(fā)展相關(guān)基因（如血管內(nèi)皮生長因子VEGF或多藥耐藥基因MDR）的表達。在治療病毒性疾病的研究中，可以設(shè)計針對病毒基因組RNA的siRNA或針對宿主細胞病毒受體的siRNA來抗病毒。