熒光素酶的測(cè)定實(shí)驗(yàn)
簡介
以熒光素(luciferin)為底物來檢測(cè)螢火蟲熒光素酶(Firefly Luciferase)活性的
原理
熒光素 4-單氧酶(ATP-水解)提取于螢火蟲,Photinus Pyralis。 熒光素+ATP+O2→氧和蟲熒光素+PPi+H2O+光 光密度 I 是和 Michaelis-Menten 等式相關(guān)的 式中,H 是 Planck 常量;v 是發(fā)射光的頻率。當(dāng) ATP 濃度非常低([ATP]<<Km)時(shí),Michaelis-Menten 等式就可以簡化成: I=常量 ×[ATP] 常量=V/Km。光密度與 [ATP] 成正比。
應(yīng)用
細(xì)胞檢測(cè)