評估毛蕊花糖苷抑制肝臟脂質沉積和減輕動脈粥樣硬化作用
1 Introduction
隨著人們生活水平的提高，過量攝入不飽和脂肪酸、碳酸飲料以及吸煙、飲酒等不健康的生活習慣導致人體內脂質代謝失調，而血脂的異常增加了動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）的風險。目前，臨床中常使用他汀類藥物進行動脈粥樣硬化的治療，但作為需要長期服藥的慢性疾病，其帶來的肌痛、肌炎的不良反應及誘發2型糖尿病（diabetes mellitus type 2，T2DM）的風險成為該類藥物亟需解決的問題。
據美國農業部統計，2019年全球橄欖油產量為320萬噸。雖然食品工業為人類社會的發展帶來了巨大的效益，但在橄欖加工過程中由三相萃取所產生的大量橄欖加工廢水（olive mill wastewater，OMW）也帶來了諸多環境問題。已有研究發現，OMW中富含毛蕊花糖苷等多酚類化學成分，如何將這一食品資源寶庫高效地再利用是減少食品廢料和廢物利用的重要挑戰。毛蕊花糖苷是由苯乙醇、咖啡酸和α-鼠李糖基-β-吡喃葡萄糖組成的苯乙醇糖苷類成分，其廣泛分布于列當科、玄參科、木蘭科和唇形科等多種藥用植物中。毛蕊花糖苷在抗腫瘤、抗抑郁、神經保護、抗炎和抗氧化方面具有積極的作用，此外近期有研究發現富含毛蕊花糖苷的肉蓯蓉總苷在由飲食/鏈脲佐菌素誘導的糖尿病大鼠中具有降血糖和降血脂作用，而其中的毛蕊花糖苷是否能產生類似的藥效學作用尚不清楚。
在本文中，研究人員使用高脂飲食誘導建立了ApoE-/-小鼠動脈粥樣硬化模型，通過給藥干預評估了毛蕊花糖苷抑制肝臟脂質沉積和減輕動脈粥樣硬化作用。此外，基于非靶向脂質組學對毛蕊花糖苷的降脂作用進行了初步探討。
2 Results and discussion
2.1 毛蕊花糖苷抑制動脈粥樣硬化的發展
經過16周的高脂飲食，模型組相比空白組主動脈斑塊面積、厚度顯著增加（P<0.01），同時血漿中TC、TG、LDL-C的水平顯著升高。在第4周開始進行給藥干預，毛蕊花糖苷高劑量可以將斑塊面積從模型組的(29.97±3.71)%顯著降低至(17.53±1.67)%（P<0.001），斑塊厚度則從(16.74±1.28)%顯著降至(10.84±1.23)%（P<0.001）。此外，經過12周不同劑量的治療，與模型組相比，毛蕊花糖苷給藥可使TC和TG顯著降低，同時中劑量、高劑量毛蕊花糖苷使LDL-C顯著降低，而給藥組的HDL-C無明顯變化。
2.2 毛蕊花糖苷減輕肝臟脂質沉積
肝臟H&E染色結果顯示，給藥組的脂滴明顯減少，肝細胞腫脹緩解，炎性浸潤減輕。此外，與對照組相比，模型組血漿中AST、ALT和LDH含量顯著升高，表明肝臟有嚴重的炎性損傷，給藥組可以將其調節回正常水平。
2.3 毛蕊花糖苷對肝臟脂代謝的調節
通過肝臟脂質組分析，發現相較于空白組，模型組有504個脂質發生上調，440個脂質發生下調，包括甘油磷脂（GPs）、脂肪酰（FAs）、鞘脂（SPs）、甘油酯（GLs）、糖脂（SLs）和甾醇（STs），毛蕊花糖苷中、高劑量給藥分別可使其中40個、166個差異脂質水平調歸。
將篩選出的差異脂質做進一步的富集分析，顯示毛蕊花糖苷所影響的差異脂質主要集中在甘油磷脂代謝通路中。基于此，將脂質組結果進行歸一化并對各脂質類別進行相對含量變化分析，發現毛蕊花糖苷可顯著調節肝臟心磷脂（CL）、醚連磷脂酰膽堿（ether PC）、溶血磷脂酰膽堿（LPC）、磷脂酰膽堿（PC）和氧化磷脂酰膽堿（OxPC）等代謝異常，使其恢復到正常水平。
2.4 毛蕊花糖苷對甘油磷脂代謝相關蛋白的影響
LCAT、PLA2和LPCAT是甘油磷脂代謝中的重要酶，參與多種磷脂的生物合成與代謝。ELISA結果表明，模型組的PLA2顯著降低，而毛蕊花糖苷高劑量可將其調節回正常水平。雖然模型組LCAT水平與對照組未見明顯差異，但毛蕊花糖苷給藥可使其顯著增加。此外給藥組中LPCAT3的顯著降低表明毛蕊花糖苷對其具有抑制作用。以上結果與脂質組結果一致。
3 Conclusion
本研究為毛蕊花糖苷在高脂飲食誘導的ApoE-/-小鼠中的抗動脈粥樣硬化作用提供了依據。同時非靶向脂質組學分析表明，毛蕊花糖苷通過調節肝臟中的甘油磷脂代謝發揮減少脂質沉積的作用。此外，LCAT、PLA2和LPCAT3的測定初步驗證了脂質組學結果。本研究為毛蕊花糖苷提供了更廣闊的應用前景，并為從食品工業副產品和藥用植物中尋找潛在的抗動脈粥樣硬化前體藥物提供了理論基礎。
