慢性不可預知溫和應激 (CUMS) 模型實驗
基本方案
原理
通過建立慢性不可預知溫和應激模型,模擬抑郁癥患者的疾病狀態,可用于抗抑郁藥物的篩選和抑郁癥病理生理機制的實驗研究。藥物干預依據個人實驗設計,一般是灌胃或者注射給藥。干預一般在造模結束后1-2d即可,一般來說,隨著恢復時間越長,動物的癥狀緩解程度越好,21d后,仍有癥狀殘留。最簡單有效的辦法是檢測糖水偏好。
材料與儀器
雄性SD大鼠 體重200-250g
強迫游泳桶 電擊箱 束縛罐 彩燈等
步驟
1大鼠稱重,按每籠5-6只飼養,動物在21d的時間內接受慢性、不可預知的溫和刺激,模擬人類日常生活中接受的慢性低強度應激。每天從日間夜間中各挑選一種刺激對大鼠進行處理,順序隨機,連續不重復,使大鼠不能夠預計刺激的出現(表4-4)。每周測量一次體重,以觀察抑郁動物體重變化。
2日間刺激:
②在強迫游泳桶中加入4℃冰水,每桶中1只大鼠,游泳5min;
②每只大鼠單獨接受足底電擊,2mA,間隔10s,電擊4s,重復2次;
③搖晃鼠籠10min(強度以大鼠不能站穩為準),方向不定;
④大鼠放于束縛罐中束縛2h;
⑤單籠隔離所有大鼠,孤獨3h;
⑥胡椒粉撒入鼠籠,氣味刺激;
⑦將所有大鼠放入狹窄的桶中,擁擠3h。
3夜間刺激:
②持續電燈光照;
②在鼠籠墊料上噴灑水,潮濕處理;
③將鼠籠傾斜45°;
④彩燈置于鼠籠上方,持續閃爍;
⑤禁水禁食12h。
結果判定CUMS模型可通過體重檢測、糖水偏好測驗、曠場實驗等來評價。成功的模型組與對照組相比,出現了體重減輕、糖水消耗降低、自主活動減少等特點,模擬了人類抑郁癥患者的癥狀。
注意事項
1.實施強迫游泳時注意防止大鼠淹溺。
2.束縛過程中注意防止大鼠將罐體啃咬出洞口,以及逃跑時被卡住。
3.彩燈要懸掛在鼠籠上方保持距離,以免大鼠啃咬電線。
常見問題
大鼠之間對于電擊強度的耐受性有個體差異,而且會由于電擊箱底部的生銹老化和老鼠糞便的影響,使電流產生變化,可以適當加大電流刺激來解決。