坐骨神經(jīng)移植及熒光金逆行性標記

原理

材料與儀器

實驗動物
1%戊巴比妥鈉 熒光金
手術顯微鏡 顯微手術器械

步驟

(1)-(5)與視神經(jīng)橫斷模型及熒光金逆行標記相同，不再贅述。

(6)在眼球后極1mm處以顯微剪剪斷視神經(jīng)。

(7)取自體大鼠一側坐骨神經(jīng)約1cm長，準備移植。

(8)采用11-0帶針縫合線將坐骨神經(jīng)縫合到眼球后極，然后將坐骨神經(jīng)的縫合端套入視神經(jīng)，使其包裹住視神經(jīng)，周圍墊以明膠海綿，防止視神經(jīng)從坐骨神經(jīng)內(nèi)滑脫。

(9)將坐骨神經(jīng)的另一端縫合到眼眶上緣。

(10)術畢縫合眼眶以及頭皮，抗感染處理，調(diào)整頭皮張力，可容雙瞼閉合。術中及術后觀察手術側眼底供血情況。

(11)在25d時，采用戊巴比妥鈉麻醉動物，剪開頭皮，找出縫合在眼眶上緣的坐骨神經(jīng)，剪斷末端。

(12)剪取小片封口膜并展蒲，戳一小孔，容坐骨神經(jīng)通過，一小塊明膠海綿浸吸5%熒光金溶液，包埋坐骨神經(jīng)以逆行標記節(jié)細胞。將封口膜折疊包裹坐骨神經(jīng)及明膠海綿。

(13)術后縫合頭皮。

(14)3d后，注射過量戊巴比妥鈉處死動物，取眼球進行視網(wǎng)膜鋪片及全視網(wǎng)膜節(jié)細胞計數(shù)。

3視神經(jīng)夾傷模型視神經(jīng)夾傷模型在近年來被一些實驗室采用,這里也一并進行介紹。

(1)-(5)與視神經(jīng)橫斷模型極熒光金逆行標記實驗相同。

(6)在眼球后極1.5mm處以5#攝子(Dumont)夾持10s。

(7)術畢縫合眼眶，以及頭皮，調(diào)整頭皮張力，可容雙臉閉合。術中及術后觀察手術側眼底供血情況。