LFB 髓鞘染色法

原理

勞克堅牢藍(LuxolFastBlue,LFB)屬于銅－酞箐染料，在酒精溶液中具有與髓鞘磷脂結合的染色特性。應用LFB髓鞘染色可以很好地顯示出神經組織的髓鞘結構。

材料與儀器

髓鞘
LFB溶液 0.05%碳酸鋰溶液 0.25%焦油紫溶液
濾器

步驟

1、切片經蒸餾水清洗后，入0.1% LFB溶液，于60℃密封浸染8-16h。

2、經蒸餾水清洗后，入95%酒精。

3、以0.05%碳酸鋰水溶液分色10s以上。

4、經70%酒精繼續分色，直至顯微鏡下觀察灰、白質區分清晰為止。

5、 蒸餾水洗片后，用0.25%焦油紫溶液加數滴冰醋酸染液復染10min。

6、70%酒精將復染顏色分至細胞核及尼氏體呈紅色。

7、濾紙沾盡多余液體，入正丁醇2次漂洗脫水，每次脫水時間3-5min。

(8)二甲苯透明，中性樹膠封片。髓鞘呈鮮藍色，核呈深藍色

注意事項

1、切片若為石蠟切片，要在二甲苯中先脫蠟，再至無水乙醇。

2、0.05%碳酸鋰水溶液分色應該在顯微鏡下進行，至背景呈灰色為止。70%酒精再次分色時，至背景無色為止。

常見問題

1、LFB染色完后，可用焦油紫溶液或蘇木素－伊紅復染，這樣能更好地顯示出細胞的形態。

2、復染之后要入正丁醇漂洗脫水，這樣染色效果更佳。

3、溶液配制：勞克堅牢藍1g,95%酒精100ml,10%冰醋酸0.5ml?；靹蚝筮^濾，室溫保存。