蘇木精/伊紅染色

材料與儀器

水化并顯影的原位雜交玻片
蘇木精染料（用乙酸處理的Harris改進(jìn)蘇木精 無汞) 0. 1%氫氧化銨 伊紅染料
玻璃染色盤

步驟

1) 將顯影過的載玻片（在玻片架中）放入盛有水的染色盤中。

2) 在染色盤中準(zhǔn)備以下各組液體：

1個盤： 蘇木精染液

2個盤： 水

1個盤： 0.1%氫氧化銨

2個盤： 水

1個盤： 伊紅染液

1個盤： 95%乙醇

2個盤： 100%乙醇

3個盤： 二甲苯

3) 在蘇木精染液中染玻片20?30 s，勿染過深。水中浸泡2次，每次2 min。

4) 快速浸于0.1%氫氧化銨，然后浸入水中。

如果在0.1%氫氧化銨中浸泡時間過長，放射自顯影乳膠會從玻片上脫離。

5) 以水浸洗5 min,然后用伊紅染色20?30 s。

如染色過深，可將玻片浸于50%乙醇中，脫色片刻（觀察染料擴散狀況）；如染色過弱，可再染。

6) 在同一盛95%乙醇的盤中，浸洗玻片8次，然后，于100%乙醇中浸8次，再置 100%乙醇中2 min使完全脫水。在二甲苯中平衡3次，每次2 min。

7) 按基本方案步驟5?9操作，進(jìn)行固片處理。