磷酯酰絲氨酸外化的檢測
材料與儀器
細胞樣品
結合緩沖液 膜聯蛋白 HEPES 緩沖液
組織培養板
步驟
1. 在 96 孔圓底組織培養板每孔中加入 100 μl 細胞樣品,200 g 離心 5 分鐘。
2. 吸出上清,在結合緩沖液中用 100 μl 膜聯蛋白 V-FfffC 重懸細胞。室溫避光培育 5 分鐘。加入 100 μl HEPES 緩沖液,將樣品轉移至 FACS 微管中。
3. 在進行 FACS 分析之前,加入 20 μl PI。用散點圖或密度圖分析結果,繪出 EL1XFL2。膜聯蛋白 V 陽性,PI 陰性細胞即為凋亡。雙染細胞或是壞死,或是凋亡晚期。