X射線片放射自顯影檢測32P標記的蛋白質
材料與儀器
樣品
凝膠
Whatman 3MM 濾紙
步驟
1. 單向或雙向凝膠電泳分辨 32P 標記的樣品。
2. Whatman 3MM 濾紙上或者兩張塞璐玢膜（Bio-Rad) 之間吸干凝膠。用放射性墨水在凝膠邊緣標幾個點。
3. 完全黑暗或安全光（用柯達 GBX-2 或 6B 濾光片遮光）下，在 X 射線片曝光夾里，將柯達 X-OMAT-AR 膠片放在凝膠與增感屏（DuPont Cnone) 之間。確保膠片與凝膠及增感屏的閃爍體面緊密接觸。如果用到第二塊增感屏，應將它放在凝膠的另一面，讓凝膠與膠片夾在兩塊增感屏之間。用兩塊塑料板夾緊曝光夾，于 -70℃ 曝光。
4. 沖洗 X 射線片，顯影。
5. 依放射性記號，在讀片機里將考馬斯亮藍染色膠與放射自顯影圖排列好，鑒定磷酸化靶蛋白，拍照。
6. 切下含靶蛋白的膠條，用液閃計數器檢測磷酸化蛋白的放射性。
