人類嗜T細胞病毒特異性抗體的檢測方法
簡介
檢測特異性抗體是 HTLV 感染實驗室診斷的主要依據。檢測程序為先進行初篩試驗,初篩試驗陽性血清需經 WB 試驗確認。目前初篩試驗常用方法是 ELISA 法和間接免疫熒光法。
材料與儀器
試劑:
① 抗人 IgG;
② HTLV-1/2 抗體。
步驟
人類嗜 T 細胞病毒特異性抗體的檢測方法的基本過程可分為如下幾步:
(一)ELISA 法
A 用 HTLV-1 型病毒裂解物或裂解物+重組 p21 蛋白作為抗原,與患者血清反應后再加酶標記的抗人 IgG,最后加酶底物顯色來檢測血清中的 HTLV-1/2 抗體;HTLV-1 型和 HTLV-2 型有血清交叉反應,常規血清學方法不能區分,可使用重組 Env 蛋白或型特異性合成肽抗原檢測相應抗體,區別 HTLV-1 型和 HTLV-2 型感染。ELISA 檢查 HTLV 抗體快速、敏感,但缺乏特異性,可出現假陽性反應。經 ELISA 初篩后陽性血清需用 WB 試驗確認。
(二)間接免疫熒光法
B 以 HTLV-1/2 感染的 T 細胞株作靶細胞抗原制成細胞涂片,加入患者血清反應后再加熒光素標記的抗人 IgG,熒光顯微鏡下觀察熒光陽性細胞,判定患者血清中有無特異性 HTLV-1/2 抗體。陽性血清需經 WB 試驗確認。