放線菌形態(tài)觀察實(shí)驗(yàn)-扦片法
原理
將放線菌接種在瓊脂平板上，扦上滅菌蓋玻片后培養(yǎng)，使放線菌菌絲沿著培養(yǎng)基表面與蓋玻片的交接處生長而附著在蓋玻片上匾觀察時(shí)，輕輕取出蓋玻片。置于載玻片上直接鏡檢。這種方法可觀察到放線菌自然生長狀態(tài)下的特征，而且便于觀察不同生長期的形態(tài)。
材料與儀器
細(xì)黃鏈霉菌／青色鏈霉菌／弗氏鏈霉菌
滅菌的高氏1號瓊脂 平皿 蓋玻片 載玻片 接種環(huán) 鑷子 顯微鏡
步驟
1. 倒平板
取融化并冷至大約 50 ℃ 的高氏 1 號瓊脂約 20 ml 倒平板，凝固待用。
2. 接種
用接種環(huán)挑取菌種斜面培養(yǎng)物（孢子）在瓊脂平板上劃線接種。劃線要密些，以利扦片。
3. 扦片
以無菌操作用鑷子將滅菌的蓋玻片以大約 45° 角扦入瓊脂內(nèi)（扦在接種線上）（圖 IV-7），扦片數(shù)量可根據(jù)需要而定。
4. 培養(yǎng)
將扦片平板倒置， 28 ℃ 培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間根據(jù)觀察的目的而定，通常 3～5 d。
5. 鏡檢
用鑷子小心拔出蓋玻片，擦去背面培養(yǎng)物，然后將有菌的一面朝上放在載玻片上，直接鏡檢。
注意事項(xiàng)
觀察時(shí)宜用略暗光線：先用低倍鏡找到適當(dāng)視野。再換高倍鏡觀察。如果用 0.1% 美藍(lán)對培養(yǎng)后的蓋玻片進(jìn)行染色后觀察，效果會(huì)更好。
