乙酰膽堿酯酶染色
問：我想利用乙酰膽堿酯酶染色將小鼠結(jié)腸平滑肌中的膽堿能神經(jīng)顯示出來，并用軟件作定量分析，但不知該染色方法所用試劑及具體方法，上海何處可做該染色？請各位大俠幫幫忙！
另不知這種方法與將腸黏膜勻漿后測定乙酰膽堿酯酶，那一種更好？謝謝！
答：乙酰膽堿酯酶（Acetylcholinesterase）
染色步驟
1、下述溶液內(nèi)孵育15分鐘37C
碘化乙酰硫膽堿 12.5 mg
蒸餾水 2.5 ml
0．82%醋酸鈉 15.5 ml
0．6%醋酸 0.5 ml
2．94%檸檬酸鈉 1.5 ml
0．75%硫酸銅 2.5 ml
0．165%鐵氰化鉀 2.5 ml
（總量25 ml）
2、水洗
3、蘇木精染色1分鐘
4、水洗1-2分鐘
5、脫水、透明、封固
乙酰膽堿酯酶染色方法2
染色步驟
1、福爾馬林前固定15~25分鐘
2、去離子水充分沖洗兩次，每次1分鐘
3、在下述基質(zhì)內(nèi)孵育4小時(shí)，40C
碘化乙酰硫膽堿 5 mg
0．1M 馬來酸氫鈉緩沖液PH6.0 6.5 ml
0．1M枸緣酸鈉溶液 0.5 ml
0．03M硫酸銅 1 ml
蒸餾水 1 ml
0．005M高鐵氰化鉀 1 ml
問：謝謝高人指點(diǎn)，我想問一下鐵氰化鉀哪里能買到呀，組織要冰凍處理嗎？
答：鐵氰化鉀，一般化學(xué)試劑中心都可購到，我們實(shí)驗(yàn)室采用冰凍切片。需要注意的是，乙酰膽堿酯酶染色需要的是無離子水，入反應(yīng)液時(shí)要用無離子水漂洗干凈（3次，每次2min），反應(yīng)液要現(xiàn)配現(xiàn)用，不能超過30min，反應(yīng)液的PH值也很重要，否則會影響棕紅色沉淀的效果。
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