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RNAi與異染色體RNA干擾（RNAinterference，RNAi）是由雙鏈RNA（double-strandedRNA，dsRNA）引發(fā)的轉(zhuǎn)錄后基因靜默機(jī)制。RNAi是真核生物中普遍存在的抵抗病毒入侵、抑制轉(zhuǎn)座子活動(dòng)、調(diào)控基因...

RNA的新地位RNA研究的新成果不斷出現(xiàn)和有關(guān)RNA操作新技術(shù)的應(yīng)用是進(jìn)入21世紀(jì)以來分子生物學(xué)研究的重要突破之一。依據(jù)國內(nèi)外的大量最新資料，主要述評RNA研究中所揭示的新理念、反義RNA技術(shù)應(yīng)用進(jìn)展、...

Northernblot技術(shù)一、經(jīng)乙二醛和二甲基亞砜變性處理后進(jìn)行的RNA電泳這一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。含有乙二醛－DMSO的凝膠比含有甲醛的凝膠更難于進(jìn)行電泳，因?yàn)榍罢哂緞?dòng)速率較慢而且需將電泳...

兔肝RNA的制備及測定細(xì)胞內(nèi)大部份RNA均與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起，并且多以核蛋白的形式存在。因此，分離制備RNA時(shí)，首先遇到的是必須使RNA與蛋白解離，并除去蛋白質(zhì)。由于RNA的種類來源和存在形式不同，所...

肝中DNA的分離和鑒定[原理]細(xì)胞內(nèi)的核酸多以核蛋白的形式存在，其中脫氧核糖核蛋白主要存在于細(xì)胞核中，核糖核蛋白主要存在于細(xì)胞質(zhì)中。這兩類核蛋白在0.14mol／L氯化鈉溶液中的溶解度相差很大，核糖核蛋白在此溶...

FISH-熒光原位雜交實(shí)驗(yàn)（原位雜交）1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^實(shí)驗(yàn)了解熒光原位雜交技術(shù)的基本原理和在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用。掌握原位雜交技術(shù)的操作方法，熟練掌握熒光顯微鏡的使用方法。2.實(shí)驗(yàn)原理熒光原位雜交（Fluo...

熱酚法抽提酵母總RNA的方法1.將酵母細(xì)胞培養(yǎng)在3ml選擇性培養(yǎng)基中，30℃過夜旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)。2.稀釋過夜培養(yǎng)的菌液，重新在10ml培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞。3.OD600達(dá)到1.0時(shí)，收菌，4000rpm/min離心5min,棄培養(yǎng)基。4.將細(xì)胞懸浮...

NorthernBlotting反應(yīng)北方雜合反應(yīng)的步驟主要包括：（1）加入核酸探針，使與固定于尼龍膜上的特定RNA進(jìn)行雜合反應(yīng)；（2）待雜合反應(yīng)結(jié)束后以含鹽緩沖液與SDS洗掉非專一性結(jié)合于尼龍膜上的核酸探針。進(jìn)行反應(yīng)...