轉管及轉瓶培養

轉管培養法（roller tube culture）是Gey 提出的，實驗室常用，為了擴大細胞產量，將試管改用轉瓶，故稱轉瓶培養，其培養方法是一樣的，試管或轉瓶固定在支加上，傾斜度為5°～10°左右，或將轉瓶放在一排排轉軸之間，使轉瓶隨著轉軸以每小時6～12 轉緩慢轉動。

細胞貼附于玻璃壁四周，細胞貼壁和生長只有一個表面面積，經轉動一方面使培養液流動，利于細胞吸收營養和進行代謝，一方面使細胞有機會接觸氣體，有利于細胞呼吸和發生氧化還原作用，有利于細胞生長繁殖。

培養瓶(管)內保持有相當大的上方空間，以維持合適的氧和pH 水平，通過轉動可使細胞交替接觸培養液和空氣，營養可被充分利用。若需增加細胞產量，除可在增加轉瓶的數量和容積外，使瓶直徑盡可能小，此時表面面積可因直徑或長度的倍增而成倍增加。

轉瓶培養也可使用灌注培養系統，因此系統需要錯綜復雜回旋的可連續供應的管道進入瓶內，這是一種昂貴的選擇。

［實驗程序］：

本程序是在1400cm2(23×12cm)一次性塑料瓶上使用的（Corning 或Becton Dickinson）程序。

1、加入300ml生產培養液于轉瓶中。

2、加入1.5×107細胞。

3、在37℃下，以12轉/小時，轉動2小時，使細胞均勻貼壁。

4、減少轉動速度至5 轉/小時并連續培養。

5、在倒置顯微鏡下使用長焦距物鏡檢查細胞。

6、在細胞生長至明顯匯合時(5～6天)，移出培養液，加入0.25%胰蛋白酶，并滾動轉瓶以收獲細胞。洗去胰蛋白酶，加入新鮮培養基，可轉入擴大再培養。為了增加表面積，有人將轉瓶表面制成帶皺紋的表面或插入多層隔板。以增加表面積。

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